苯酚使蛋白质变性，同时抑制了RNase的降解作用。氯仿抽提加速有机相与液相分层，去除核由于苯酚与水有一定比例的互溶，所以如果使用非饱和酚，样品中的水分会进入酚相，样品会丢失。同时水相中也会有少量的酚，这些残留的酚会抑制后续酶反应。而饱和酚就没有丢失样品的缺点，因为它已经提前充分吸足了水分（饱和酚中含10%左右的水分），因此不会丢失样品。但由于仍然会有少数酚进入水相，抑制后续反应。氯仿的作用是让水和酚彻底分开，不互溶，彻底去除水相中的残留苯酚。异戊醇的作用是降低表面张力，从而减少操作过程（常常有震荡步骤）中气泡的产生，而这些气泡的表面张力可能会使DNA断裂。另外，异戊醇还有助于水相和酚相分相，使离心后的上层水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定，便于移取上清。

　　酚-氯仿-异戊醇的25:24:1 的混合液，用于RNA 提取时去除蛋白质、多糖、脂类和酚类等杂质。

　　酚使蛋白质变性，同时抑制了 RNase 的降解作用。氯仿抽提加速有机相 与液相分层，去除核酸溶液中的迹量酚。异戊醇减少蛋白质变性操作过程中产生 的气泡。使用酚：氯仿：异戊醇抽提离心后的上层为含 RNA 的水相、中间为变 性蛋白与 DNA，下层为有机溶剂相。 由于苯酚与水有一定比例的互溶，所以如果使用非饱和酚，样品中的水分会 进入酚相，样品会丢失。同时水相中也会有少量的酚，这些残留的酚会抑制后续 酶反应。而饱和酚就没有丢失样品的缺点，因为它已经提前充分吸足了水分（饱 和酚中含 10%左右的水分），因此不会丢失样品。但由于仍然会有少数酚进入水 相，抑制后续反应。 氯仿的作用是让水和酚彻底分开，不互溶，彻底去除水相中的残留苯酚。 异戊醇的作用是降低表面张力，从而减少操作过程（常常有震荡步骤）中气 泡的产生，而这些气泡的表面张力可能会使 DNA 断裂。另外，异戊醇还有助于 水相和酚相分相，使离心后的上层水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维 持稳定，便于移取上清。